Association entre HLA-B * et la lipodystrophie chez les patients infectés par le VIH en provenance de Thaïlande qui ont reçu un traitement antirétroviral contenant de la stavudine

Contexte Les schémas antirétroviraux contenant de la stavudine sont largement utilisés dans les pays en développement. La lipodystrophie associée à la stavudine est fréquente chez les patients traités par stavudine sans motif clairement prévisible, en raison de l’interaction inconnue entre la stavudine et l’hôte. Facteurs de risque cliniques et allèles HLA de l’antigène leucocytaire humain associés aux méthodes de lipodystrophie associée à la stavudine Une étude cas-témoins transversale a été menée chez des patients infectés par le VIH recevant des traitements antirétroviraux contenant de la stavudine. Évaluations cliniques de la lipodystrophie par examen physique, anthropométrie En fonction de leur évaluation clinique, les patients ont été classés en groupes: le groupe de cas modéré en lipodystrophie sévère et le groupe témoin en absence de lipodystrophie légère. Les caractéristiques cliniques et la distribution allélique de HLA-A, HLA- B, HLA-C, HLA-DRB, HLA-DQB, un d HLA-DPB ont été comparés entre le groupe de cas et le groupe de contrôle, afin de déterminer l’association possible avec la lipodystrophie associée à la stavudine. patients étaient dans le groupe de cas, et les patients étaient dans le groupe de contrôle Par l’utilisation de la régression logistique pas à pas vers l’avant, la présence de HLA-B * odds ratio [OR],; % intervalle de confiance [CI], -; P = et une plus longue durée de traitement à la stavudine OU; % CI, -; P = étaient significativement associés à la lipodystrophie associée à la stavudine, alors qu’un indice de masse corporelle plus élevé pendant le traitement OU; % CI, -; P & lt; a été associé à un risque plus faible de lipodystrophie HLA-B * a une haute spécificité% et une valeur prédictive positive% pour lipodystrophieConclusions HLA-B * est un facteur de risque génétique fort pour la lipodystrophie associée à la stavudine chez les patients infectés par le VIH en Thaïlande HLA-B * peut être utilisé comme marqueur génétique pour prédire quels patients développeront une lipodystrophie associée à la stavudine, pour éviter ou raccourcir la durée d’utilisation de la stavudine. Cette constatation doit être confirmée dans d’autres études de réplication.

La stavudine est un inhibiteur nucléosidique de la transcriptase inverse homologué depuis par la Food and Drug Administration des États-Unis. Une combinaison générique à dose fixe de stavudine, de lamivudine et de névirapine est disponible et largement utilisée en Thaïlande et dans d’autres pays en développement. Ce régime contenant de la stavudine a été prouvé en termes d’efficacité et de tolérance pour le traitement du VIH par le virus de l’immunodéficience humaine dans les pays à ressources limitées Inhibiteurs nucléosidiques de la transcriptase inverse Les INTI, notamment la stavudine, ont plusieurs effets indésirables associés à la toxicité mitochondriale , comme l’acidose lactique , la neuropathie , la pancréatite et la lipodystrophie Cependant, la pathogénie et les mécanismes de la lipodystrophie associée à la stavudine ne sont pas bien compris. dans les études moléculaires et génétiques de la lipodystrophie La lipodystrophie associée à la stavudine pourrait être considérée comme un syndrome d’inflammation, Selon des études antérieures qui ont démontré une augmentation des concentrations plasmatiques de cytokines inflammatoires et inflammatoires , ou qui pourraient être considérées comme l’apoptose des adipocytes, comme en témoigne la diminution des facteurs adipogéniques [,,] Le développement de la pharmacogénomique capacité prédictive de déterminer la réponse d’un médicament et la susceptibilité aux toxicités ou effets indésirables sur la base de l’information de génotype d’un patient Récemment, HLA-B * et HLA-B * , variantes d’un gène dans l’histocompatibilité majeure La stavudine est l’agent antiviral le plus puissant de sa classe associé à la lipodystrophie [,,] Des études antérieures ont mis en évidence le rôle du facteur de nécrose tumorale TNF-α , un gène de la classe III du CMH, en tant que facteur de risque de lipodystrophie associée à la thérapie antirétrovirale en raison de la proximité de ces gènes HLA de l’antigène leucocytaire humain avec TNF-α, l’implication des gènes immuno-liés dans la lipodystrophie induite par le médicament, il est probable que les variations dans les régions CMH jouent un rôle important dans la détermination des cours de la lipodystrophie associée à la stavudine. Il n’existe aucune étude sur l’association entre la lipodystrophie associée à la stavudine et les gènes HLA dans le CMH de classe I et le CMH de classe II Les objectifs de la présente étude étaient de déterminer les facteurs de risque cliniques associés à la lipodystrophie associée à la stavudine. lipodystrophie associée chez les patients infectés par le VIH en Thaïlande

Méthodes

Cela se produirait si nous incluions des patients avec obésité centrale liée à l’âge Nous combinions des patients sans lipodystrophie avec des patients dont les signes étaient trop légers pour le groupe «modéré à sévère». La lipodystrophie légère pourrait avoir un effet moins cosmétique et clinique sur les patients. conformité à la stavudine; Ainsi, nous avons séparé les patients en un groupe «modéré à sévère» et un groupe «absent à léger» pour une analyse d’association Nous avons défini «lipodystrophie modérée à sévère» comme «groupe de cas» et «absente à lipodystrophie légère». le «groupe témoin» Les mesures anthropométriques ont été effectuées par le même diététicien tout au long de l’étude. La taille, le poids corporel, la circonférence du cou, de la poitrine, de l’aisselle, de la taille et de la hanche et l’épaisseur du pli cutané aux sites scapulaire, biceps, triceps Les épaisseurs et la circonférence des plis cutanés ont été mesurées à l’aide d’un étrier plissé et d’un ruban anthropométrique, respectivement. Les indices de masse corporelle IMC et les rapports taille-hanche ont été calculés à partir de données anthropométriques. radiométrie d’absorptiométrie DEXA Hologic Discovery A, version; Hologic ont été réalisées par un seul opérateur. Des scans ont été effectués pour accéder à la masse adipeuse, à la masse maigre et à la masse osseuse, comme décrit dans l’étude de cas de lipodystrophie. L’analyse d’impédance bioélectrique a été réalisée avec un analyseur d’impédance multifréquences. analyseur de composition Biospace, tel que décrit dans le manuel du fabricant Cet analyseur a été utilisé pour déterminer la masse graisseuse et la masse graisseuse viscérale.Les échantillons sanguins ont été analysés pour le cholestérol total sérique, le cholestérol à lipoprotéines de basse densité, le cholestérol à lipoprotéines de haute densité, les triglycérides et le sang à jeun. glucose Les processus utilisés pour évaluer le syndrome de lipodystrophie chez les patients individuels ont été complètement effectués pendant la journée, sauf pour les examens DEXA qui ont été effectués un autre jour chez certains patients mais dans quelques semaines après l’évaluation clinique. obtenu à partir de tous les patients de l’étude. Isolement de l’ADN L’ADN génomique était isolé Les concentrations ont été quantifiées à l’aide d’un spectrophotomètre UV. ND- NanoDrop Technologies La pureté a été déterminée en calculant le rapport d’absorbance à des génotypes de génotypage – nmHLA dans HLA-. A, HLA-B, HLA-C, HLA-DRB, HLA-DQB et HLA-DPB ont été déterminés par typage basé sur les séquences en utilisant les kits de typage basés sur les séquences AlleleSEQ Atria Genetics, selon les instructions du fabricant . La réaction d’amplification primaire consiste en une réaction en chaîne par polymérase Réactif de prémélange PCR, AmpliTaq Gold et ng / μL d’ADN génomique Les produits de PCR ont été purifiés en utilisant ExoSAP-IT et séquencés dans les orientations avant et inverse. de Hi-Di formamide Applied Biosystems et exécuté sur l’analyseur d’ADN ABI xl Applied Biosystems, et l’appel du génotype a été fait par le logiciel Assign SBT Conexio GenomicsAnalyse statistique Gene-w Les comparaisons de fréquences alléliques entre les groupes cas et témoins pour chaque gène ont été faites en utilisant le programme CLUMP Les tests d’association allélique individuels pour un gène montrant une association d’une analyse à l’aide du programme CLUMP ont été clarifiés test Toutes les valeurs de P & lt; ont été considérés comme indiquant une signification statistique possible Les valeurs P Pc corrigées ont été ajustées en appliquant une correction multiple génique pour chaque gène pour HLA-A, pour HLA-B, pour HLA-C, pour HLA-DRB, pour HLA-DQB, et pour HLA-DPB pour tenir compte du nombre d’allèles observés dans plus de% du nombre total de cas et de patients témoins Les données continues avec une distribution normale sont montrées comme valeurs moyennes ± écart-type [SD], et ceux avec un Les données catégoriques sont représentées sous forme de fréquence et de pourcentage. Les données continues ont été comparées entre les groupes en utilisant un test t indépendant ou le test U de Mann-Whitney. Le test or ou le test exact de Fisher a été utilisé pour analyse catégorique des données, le cas échéant Une analyse multivariée a été réalisée pour déterminer les facteurs associés à la lipodystrophie en utilisant des modèles de régression logistique multivariée avec P & lt; pour l’entrée dans le modèle et P & lt; Pour rester dans le modèle Les coefficients de corrélation produit-moment de Pearson ont été utilisés pour quantifier les corrélations entre paires entre l’entrée des variables dans le modèle L’analyse de régression progressive a été utilisée pour mesurer la contribution des variables à la valeur des variables indépendantes dans un modèle. régression logistique multivariée L’odds ratio OR et son% intervalle de confiance CI ont été estimés Toutes les analyses ont été effectuées en utilisant SPSS, version SPSS AP valeur de & lt; a été considéré comme une signification statistique

Résultats

Caractéristiques des patients Cent trente-trois patients d’une cohorte précédente ont pu être joints par courrier ou par téléphone. Tous avaient accepté de participer à cette étude Tous les patients avaient terminé le processus d’évaluation du syndrome de lipodystrophie, sauf pour les patients qui refusaient un scanner DEXA à cause de la claustrophobie Tous les patients avaient déjà des données de génotype dans les gènes HLA de l’étude précédente. Quarante-neuf patients étaient des hommes. Le poids corporel moyen ± écart-type était de ± kg et la moyenne ± écart-type était de ± cm. Cinquante patients avaient des antécédents de sida. La durée médiane de l’infection par le VIH connue était de mois IQR, – mois La durée médiane du traitement antirétroviral était de mois IQR, – mois, et la durée médiane du traitement stavudine était mois IQR, – mois Le CD médian Le nombre de cellules au début de l’étude était de cellules / mm IQR, – cellules / mm Le nombre de patients qui avaient une charge virale indétectable au début de l’étude était de% Il y avait des patients dans le groupe de cas et p Le groupe témoin était constitué de patients atteints de lipodystrophie modérée et de patients atteints de lipodystrophie sévère. Le groupe témoin était constitué de patients sans lipodystrophie et de patients atteints de lipodystrophie légère. La lipoatrophie était une caractéristique prédominante de la lipodystrophie et la lipohypertrophie était rare. Entre les groupes de cas et de contrôle Dans le groupe de cas, il y avait des proportions plus élevées de patients ayant des antécédents de maladie définissant le SIDA P =, une charge virale indétectable au début de l’étude P =, et HLA-B * P = Autres caractéristiques de base n’étaient pas significativement différents entre les groupes

Tableau Tableau largeTélécharger les lamesCaractéristiques cliniques des patients de l’étudeTable Voir grandDisque de téléchargementCaractéristiques cliniques des patients de l’étudeLe tableau de composition corporelle montre les données anthropométriques, les données de composition corporelle et les données métaboliques. Les patients du groupe de cas présentaient un poids corporel inférieur statistiquement significatif au départ de l’étude. La taille, le poids corporel au début de la thérapie antirétrovirale, la circonférence du cou, et le rapport taille / hanche entre les groupes ne différaient pas significativement. Dans l’analyse d’impédance bioélectrique, le groupe de cas avait une masse corporelle significativement plus faible Dans les examens de DEXA, le groupe de cas présentait des membres inférieurs statistiquement significatifs du bras, de la jambe, des membres et du tronc, une masse totale inférieure et une masse grasse totale inférieure à celle du groupe témoin. pas différent entre les groupes

Vue de la table grandDiagnosticAnthropometric, composition corporelle, et les paramètres métaboliques à la base de StudyTable View largeDownload slideAnthropometric, composition corporelle, et les paramètres métaboliques à la base de StudyAssociation entre HLA-B * et lipodystrophie modérée à sévère Avec les données existantes sur les séquences d’ADN , nous avons déterminé génotypes aux locus HLA-A, HLA-B, HLA-C, HLA-DRB, HLA-DQB et HLA-DPB dans l’ensemble des patients dans le groupe de cas et dans l’ensemble des patients du groupe témoin HLA-B * l’allèle a été observé à une fréquence significativement plus élevée dans le groupe de cas que dans le groupe de contrôle Après la correction de tests multiples, HLA-B * est restée significativement différente entre les groupes de cas et de contrôle Pc = Le HLA-B * était présent dans un total des patients%:% du groupe de cas et seulement% de la table du groupe de contrôle La taille de l’effet élevé de HLA-B *, incorporé avec des preuves statistiques convaincantes après une correction de tests multiples, a soutenu cet allèle ou t tuyau en déséquilibre de liaison élevée avec cet allèle comme la variation génétique causative

Diagramme de HLA-B * entre Case Group et Control GroupTable View largeTélécharger slideStatus de HLA-B * entre le groupe de cas et le groupe témoin Facteurs de risque pour la lipodystrophie associée à la stavudine Dans le modèle de régression logistique multivariée, l’IMC au début de l’étude. ; % CI, -; P & l ;, la durée du traitement à la stavudine OU; % CI, -; P =, et le statut HLA-B * OR,; % CI, -; P = ont été identifiés comme significativement associés à la lipodystrophie modérée à sévère associée à la stavudine. HLA-B * avait une sensibilité de%, une spécificité de%, une valeur prédictive positive de% et une valeur prédictive négative de%

Table View largeTélécharger la diapositive Analyse multivariée des facteurs de risque associés à la lipodystrophie associée à la stavudineTable View largeTélécharger une diapositive Analyse multivariée des facteurs de risque associés à la lipodystrophie associée à la stavudine

Discussion

À notre connaissance, c’est le premier rapport qui montre comment l’allèle HLA-B * influe sur la lipodystrophie associée à la stavudine. Les résultats de l’association HLA-B * fournissent un support statistique du rôle joué par le locus MHC de classe I Lorsque nous avons combiné ce facteur génétique avec des facteurs cliniques dans le modèle de régression, nous avons trouvé que HLA-B * était le facteur de risque le plus important de la lipodystrophie associée à la stavudine dans la présente étude.Il y a des preuves d’augmentation des macrophages dans le tissu adipeux. et la preuve d’une augmentation de l’expression génique et de la traduction des cytokines pro-inflammatoires et inflammatoires, telles que IL-, IL-, IL-, et TNF-α [, -] Le locus CMH est situé dans la région p du chromosome humain et contient plus que des gènes de fonction diverse HLA-B est un antigène de surface cellulaire exprimé de façon omniprésente présentant des protéines pour la présentation de l’antigène qui sont vitales au cours des premières étapes des réponses immunitaires Var Par conséquent, l’association entre HLA-B * et la lipodystrophie associée à la stavudine pourrait s’expliquer par le rôle joué par HLA-B * dans la présentation de l’antigène cancer du poumon. Si ces résultats sont confirmés dans de futures études prospectives, il sera possible d’utiliser cet allèle pour éviter une partie substantielle de la lipodystrophie associée à la stavudine en utilisant un agent antirétroviral alternatif. Pour les patients avec HLA-B * Dans les situations où la stavudine ne peut pas être totalement remplacée par la zidovudine ou le ténofovir en raison de ressources limitées, HLA-B * peut être utilisé pour sélectionner un sous-groupe de patients présentant un risque plus élevé de lipodystrophie. stavudine avec d’autres INTIs avec toute étude d’association génétique, les faux positifs ne peuvent être exclus à ce stade en raison de la nature des tests multiples en génétique. Si cette constatation n’est pas faussement positive, l’allèle causal dans ce loci pourrait ne pas être le HLA-B * lui-même mais d’autres polymorphismes génétiques étroitement liés qui HLA-B *, en raison d’un déséquilibre de liaison entre HLA-B * et les polymorphismes voisins qui n’ont pas été génotypés dans cette étude. La réplication de cette découverte est nécessaire dans un nouvel ensemble d’échantillons avant que l’application clinique de ce marqueur génétique puisse être testée. En plus de l’association entre HLA-B * et lipodystrophie, une plus longue durée de traitement à la stavudine s’est avérée être un facteur de risque pour la lipodystrophie associée à la stavudine Nous avons constaté que, pour chaque mois d’utilisation de la stavudine, le risque de lipodystrophie augmentait de% Cette constatation concorde avec les résultats d’études antérieures [, -] et pourrait être expliquée par l’augmentation de la durée de la toxicité des mitochondries. Cette étude a reçu de la stavudine pendant ~ ans, mais certains patients n’avaient jamais eu de lipodystrophie. Ceci justifie la possibilité que la susceptibilité génétique joue un rôle dans la lipodystrophie associée à la stavudine. Cette étude présente plusieurs limites. en raison de la nature des études pilotes, et il y a un biais d’échantillonnage parce que la conception initiale était celle d’une étude cas-témoins qui recrutait des patients sur la base du statut éruptif induit par la névirapine, mais nous avions exclu l’effet de biais. par une analyse logistique multivariée et prouvé qu’une éruption cutanée induite par la névirapine n’est pas associée à la lipodystrophie Nous n’avons pas pu établir l’apparition précise de la lipodystrophie Études prospectives futures avec une plus grande taille d’échantillon pour reproduire cette découverte et explorer les marqueurs génétiques proches qui élucident les modèles de déséquilibre dans ce locus sont nécessaires Deuxièmement, tous les patients de l’étude dans la présente étude sont asiatiques Ainsi, les résultats de cette étude peuvent ne pas être applicables à d’autres ethnies jusqu’à ce qu’il y ait une validation d’une étude prospective impliquant d’autres patients non asiatiques. En conclusion, HLA-B * est un marqueur génétique significativement associé à la lipodystrophie associée à la stavudine. que le facteur de durée du traitement à la stavudine Pour chaque patient, si ce risque génétique est confirmé, le marqueur peut être utilisé pour déterminer s’il faut créer un régime antiviral personnalisé bien avant que les symptômes de lipodystrophie HLA-B * puissent jouer un rôle dans l’utilisation clinique et devrait être évalué davantage, pour éviter la lipodystrophie associée à la stavudine

Remerciements

Nous remercions tous les membres du personnel et les médecins de la Division des maladies infectieuses, département de médecine, unité de virologie et de microbiologie moléculaire, Département de pathologie, Faculté de médecine Hôpital Ramathibodi, Université Mahidol, Bangkok, et Ministère de la santé publique, Nonthaburi, Thaïlande , pour leur contribution à notre étude Soutien financier Ce travail a été soutenu par une subvention du Centre d’excellence pour les sciences de la vie en Thaïlande et la collaboration DMSc-RIKEN pour le soutien du génotypage aux chercheurs en Thaïlande. Conflits d’intérêts potentiels Tous les auteurs: no conflict |

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